Harley Quinn und Poison Ivy stoßen in Noonans Bar auf einen scheinbar völlig geläuterten Joker, der friedlich als Barkeeper arbeitet und nur noch an seine Freundin und deren Kinder denkt. Ivy will ihn sofort töten, doch Harley ist überzeugt, dass sich Menschen ändern können. Um Ivys Grundsatz, im Kern bleibe jeder, wer er ist, zu widerlegen, erzählt Harley von ihrer eigenen Vergangenheit.
Im Rückblick tritt die junge Psychologin Harleen Quinzel ihren ersten Tag im Arkham Asylum an. Bezirksstaatsanwalt Harvey Dent und Commissioner Gordon setzen sie darauf an, dem Joker den Standort einer in Gotham versteckten Bombe zu entlocken. Auf dem Weg zu seiner Zelle begegnet sie dem Riddler und einer feindseligen Poison Ivy, die gerade einen Ausbruchsversuch unternimmt.
Nach einem schwierigen ersten Gespräch – der Joker versucht sogar, sie zu töten, ist zugleich aber von ihr fasziniert – holt sich Harleen bei Ivy Rat. Sie erfährt, dass der Joker seine frühere Therapeutin tötete, als das Gespräch auf seine Familie kam. Harleen nutzt das aus und lockt ihm eine rühselige Geschichte über einen gewalttätigen, wohlhabenden Vater heraus. Im Gegenzug für ein gemeinsames Essen verrät der Joker, die Bombe liege in Little Italy.
Während Batman und die Behörden das gleichnamige Viertel absuchen, zeigt sich die Wahrheit: Die Bombe steckt im Anstaltskoch mit dem Spitznamen Little Italy, der prompt explodiert. Der Joker nimmt Harleen als Geisel; Harvey Dent lässt durch sie hindurch auf ihn schießen, doch Ivy fängt die Kugel ab – als Dank für eine Pflanze, die Harleen ihr zuvor geschenkt hatte. Joker und Ivy werden wieder gefasst.
Dent will Harleen dafür befördern, doch sie spuckt ihm ins Gesicht, nennt ihn Two-Face und kehrt als Therapeutin des Jokers – und nun auch Ivys – nach Arkham zurück.
Zurück in der Gegenwart deckt Ivy auf, dass die Missbrauchsgeschichte des Jokers in Wahrheit ihre eigene war, die er sich nur angeeignet hatte. Als Schiedsrichter holen die beiden Doctor Psycho hinzu, der bestätigt, dass der Joker tatsächlich keinerlei Erinnerung an sein altes Ich hat und ein spießig-heiles Familienleben führt – was Harley und Ivy gleichermaßen anwidert. Beim Verlassen der Bar werden sie von Two-Face verhaftet. Dem Joker wird schließlich ein Foto seiner Kinder mit Sauce im Gesicht geschickt, worauf er kurz in sein altes, irres Lachen verfällt, sich dann aber wieder fängt.
